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DNA重組技術(shù)中最常用的工具酶

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01

限制性核酸內(nèi)切酶 識(shí)別DNA特定序列,切斷DNA鏈


DNA聚合酶Ⅰ 或其大片段(Klenow)①缺口平移制作標(biāo)記DNA探針 ②合成cDNA的第二鏈③填補(bǔ)雙鏈DNA3’凹端④DNA序列分析
耐熱DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)

DNA連接酶 連接兩個(gè)DNA分子或片段

多核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羥基末端磷酸化,制備末端標(biāo)記探針

末端轉(zhuǎn)移酶 在3’末端加入同質(zhì)多聚物尾

SI核酸酶,綠豆核酸酶 降解單鏈DNA或RNA,使雙鏈DNA突出端變?yōu)槠蕉?/p>

DNA端酶Ⅰ 降解DNA,在雙鏈DNA上產(chǎn)生隨機(jī)切口

RNA酶A 降解除RNA

磷酸酶 切除核酸末端磷酸基

核酸酶
核酸外切酶(exonuclease):是從核酸的一端開(kāi)始,一個(gè)接一個(gè)把核苷酸水解下來(lái);
核酸內(nèi)切酶(endonuclease):是從核酸鏈中間水解3’,5’磷酸二酯鍵,將核酸鏈切斷。

DNA限制性?xún)?nèi)切酶 粘性末端配對(duì)重組

同裂酶 有一些來(lái)源不同的限制酶識(shí)別的是同樣的核苷酸靶子序列,這類(lèi)酶稱(chēng)為同裂酶。同裂酶產(chǎn)生同樣的切割,形成同樣的末端。

同尾酶 這一類(lèi)的限制酶來(lái)源各異,識(shí)別的靶字序列也不相同,但產(chǎn)生相同的粘性末端。由同尾酶產(chǎn)生的DNA片段,是能夠通過(guò)其粘性末端之間的互補(bǔ)作用彼此連接起來(lái)的。

 
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