在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 

基因芯片技術基本過程

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-06

1 DNA方陣的構建

  選擇硅片、玻璃片、瓷片或聚丙烯膜、尼龍膜等支持物,并作相應處理,然后采用光導化學合成和照相平板印刷技術可在硅片等表面合成寡核苷酸探針;(2)或者通過液相化學合成寡核苷酸鏈探針,或PCR技術擴增基因序列,再純化、定量分析,由陣列復制器(arraying and replicating device ARD),或陣列機(arrayer)及電腦控制的機器人,準確、快速地將不同探針樣品定量點樣于帶正電荷的尼龍膜或硅片等相應位置上,再由紫外線交聯固定后即得到DNA微陣列或芯片。

2 樣品DNA或mRNA的準備

  從血液或活組織中獲取的DNA/mRNA樣品在標記成為探針以前必須進行擴增提高閱讀靈敏度。Mosaic Technologies公司發展了一種固相PCR系統,好于傳統PCR技術,他們在靶DNA上設計一對雙向引物,將其排列在丙烯酰胺薄膜上,這種方法無交叉污染且省去液相處理的繁鎖;Lynx Therapeutics公司提出另一個革新的方法,即大規模平行固相克隆(massively parallel solid-phase cloning)這個方法可以對一個樣品中數以萬計的DNA片段同時進行克隆,且不必分離和單獨處理每個克隆,使樣品擴增更為有效快速。

  在PCR擴增過程中,必須同時進行樣品標記,標記方法有熒光標記法、生物素標記法、同位素標記法等。

3 分子雜交

  樣品DNA與探針DNA互補雜交要根據探針的類型和長度以及芯片的應用來選擇、優化雜交條件。如用于基因表達監測,雜交的嚴格性較低、低溫、時間長、鹽濃度高;若用于突變檢測,則雜交條件相反。芯片分子雜交的特點是探針固化,樣品熒光標記,一次可以對大量生物樣品進行檢測分析,雜交過程只要30min。美國Nangon公司采用控制電場的方式,使分子雜交速度縮到1min,甚至幾秒鐘。德國癌癥研究院的Jorg Hoheisel等認為以肽核酸(PNA)為探針效果更好。

4 雜交圖譜的檢測和分析

  用激光激發芯片上的樣品發射熒光,嚴格配對的雜交分子,其熱力學穩定性較高,熒光強;不完全雜交的雙鍵分子熱力學穩定性低,熒光信號弱(不到前者的1/35~1/5),不雜交的無熒光。不同位點信號被激光共焦顯微鏡,或落射熒光顯微鏡等檢測到,由計算機軟件處理分析,得到有關基因圖譜。目前,如質譜法、化學發光法、光導纖維法等更靈敏`、快速,有取代熒光法的趨勢。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.798 second(s), 1464 queries, Memory 4.18 M
主站蜘蛛池模板: 高h细节肉爽文bl文 高h细节肉爽文男男 | 毛片福利 | 视频在线视频免费观看 | 91夜夜人人揉人人捏人人添 | 能看的黄网 | 天堂中文在线资源 | 狠狠亚洲狠狠欧洲2019 | 草草操 | 天天综合天天做天天综合 | 新版天堂资源在线官网8 | 四虎影院在线播放 | 色老头久久久久久久久久 | 在线免费观看色片 | 在线看3344免费视频 | 欧洲三级网站 | 国产精品一区在线观看你懂的 | 嫩草影院入口一二三免费 | 国产美女一级视频 | 色综合天天综合网看在线影院 | www.五月天婷婷| 黄色大秀视频 | 毛茸茸成熟妇女亚洲人 | 国产成人综合网在线播放 | 55夜色66夜色国产精品站 | 免费 在线播放 | 日韩毛片免费看 | 奇米7777第四色 | 中文字幕天堂网 | 欧美性hd | 户外露出 自拍系列 | 日韩在线看片 | 手机看片自拍自自拍日韩免费 | 奇米影视狠狠 | 午夜视频www | 美女黄页在线观看 | 亚洲va久久久噜噜噜久久天堂 | 青草青青视频 | 国产一级一片免费播放视频 | 米奇色影院| 97人摸人人澡人人人超一碰 | 91一区二区三区四区五区 |