免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。
常用的標記物有熒光素和酶。熒光素標記的稱為免疫熒光法(immunofluorescent technique)常用的螢光素有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate)、羅丹明(rhodamine)等。酶標記的稱為酶標免疫法(enzyme-labeled antibody method),常用的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase),酶與底物發生反應后形成不透明的沉積物,從而顯示出抗原存在的部位。
抗體與抗原的結合方法可分為直接法和間接法兩種,直接法是將帶有標記的抗體與抗原反應,顯示出抗原存在的部位。而間接法則是在抗體抗原初級反應的基礎上,再用帶標記的次級抗體同初級抗體反應,從而使初級反應得到放大,顯示增強。