指在分離過程中逐漸改變溶劑的組成，使溶劑強度從分離開始到結束逐漸增加；使每個被洗脫的色譜峰在流經全柱時，其容量因子（K）能保持或接近最佳值。在色譜法中，對一組復雜的組分能否得到滿意的分離，與選擇適當的溶劑洗脫有很大的關系，有時使用單一的溶劑不能達到分離，往往需要采用梯度洗脫才能得到滿意的結果。所謂梯度洗脫就是將兩種或兩種以上不同極性但可以互溶的溶劑，隨著時間改變使按一定比例混合，以連續改變沖洗液的極性，使復雜組分得到良好的分離。例如在液相色譜中，梯度淋洗裝置有兩類：①外梯度淋洗：又稱低壓梯度淋洗，即將溶劑在常壓下，通過程序控制器使溶劑按一定比例混合后再輸入高壓泵。②內梯度淋洗：又稱高壓梯度淋洗，這是將溶劑經高壓泵加壓后再混合的淋洗裝置。