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等電聚焦載體兩性電解質

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-08-18

1 載體兩性電解質必需具備的條件

(i)在等電點處必需有足夠的緩沖能力,以便能控制pH梯度,而不致被樣品蛋白質或其他兩性物質的緩沖能力改變pH梯度的進程。
(ii)在等電點必需的足夠高電導,以便使一定的電流通過,而且要求具備不同pH值的載體有相同的電導系數,使整個體系中的電導均勻,如果有局部電導過小,就會產生極大的電位降,從而其他部分電壓就會太小,以致不能保持梯度,也不能使應聚焦的成分進行電遷移,達到聚焦。
(iii)分子量要小,便于與被分離的高分子物質用透析或凝膠過濾法分開。
(iv)化學組成應不同于被分離物質,不干擾測定。
(v)應不與分離物質反應或使之變性。總起來說,當一個兩性電解質的等電點介于兩個很近的pk值之間時,它在等電點的解離度大,緩沖能力強,而且電導系數高,這 就是好的載體兩性電解質。

2 理想的載體兩性電解質的合成

  用具有幾個pH值很相近的多乙烯多胺(如五乙烯六胺)為原料,與不飽和酸(如丙烯酸)發生加合反應:加合反應優先加在α、β飽和酸的β碳原子上,調節胺和酸的比例可以加上一個或多個羧基,這種合成方法與一般有機會合成不同,有機合成一般要求合成的產物愈純愈好,而這里要求合成出的產物愈復雜愈好,要有多異構物和同系物,以保證的很多具有不同而又互相接近的pK值和pI值,從而得到平滑的pH梯度。載體兩性電解質的等電點在pH3-10的范圍,分子量在300-1000之間,它們的緩沖能力等于或優于組氨酸,電導性能良好,可以使電場強度分布較均勻,它們的水溶性良好,在1%水溶液中的紫外吸收值(260mμ)很低。

 

 

 

 
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