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大花蕙蘭組織培養工廠化生產技術

放大字體  縮小字體 發布日期:2008-03-08   瀏覽次數:144
一、啟動誘導(一)母株的選擇。母株的選擇應遵循三項基本原則:1.整個群體表現出該品種的典型性狀;2.群體生長發育良好,沒有普遍發生特定病害浸染,特別是東亞蘭花葉病毒,齒舌蘭輪斑病毒;3.在符合上述條件的群體中選擇性狀優異的健壯單株作母株。(二)外植體處理


  一、啟動誘導(一)母株的選擇。母株的選擇應遵循三項基本原則:1.整個群體表現出該品種的典型性狀;2.群體生長發育良好,沒有普遍發生特定病害浸染,特別是東亞蘭花葉病毒,齒舌蘭輪斑病毒;3.在符合上述條件的群體中選擇性狀優異的健壯單株作母株。(二)外植體處理。選擇葉片未完全展開的肥壯營養芽(勿選花芽)為外植體,先剝去2~3片外層葉片,再手持蘭花葉芽梢,切去基部勝物及損傷、老化組織,最后逐層剝凈外層葉片,直至有小頂芽和小側芽露出。然后在超凈工作臺上先用70%的酒精浸泡外植體30秒,用無菌水沖洗后,再放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡8分鐘左右,再用無菌水沖洗3~4次,然后在無菌接種盤上小心切下頂芽和側芽。(三)圓球莖誘導與馴化。將切下的頂芽和側芽插入誘導培養基中,基部向下,稍稍露出芽尖。然后將其置于培養室中進行培養,光照強度1000~1500勒克斯,光照時間每天14小時,培養溫度25℃左右。10天后芽開始萌動,誘導率在85%以上。在圓球莖的誘導過程中,有80%左右的芽萌發后很容易長成小苗。誘導30天后,待小苗長至4厘米、基部膨大時,將苗切離基部,并將膨大基部縱切成厚3~4毫米的薄片,切口向下重新放入相同的新鮮培養基中,30~35天從下端切口部位可長出類似愈傷組織的圓球莖,其中頂芽誘導率最高,誘導速度也最快,側芽次之。

  二、繼代增殖和幼苗分化將圓球莖接種于繼代培養基中,然后將其置于培養室中培養,培養溫度25℃左右,光照強度3000勒克斯,光照時間每天10小時。每45~50天繼代一次,增殖倍數可在10倍以上。繼代增殖初期用濃度為1.5×10-6至2×10-6的6-BA(植物生長調節劑)可以較快地積累材料,隨著繼代次數的增加,特別是15代以后或變異株開始出現后,只能用濃度為0.5×10-6至1.5×10-6的6-BA(植物生長調節劑),并在生產中及時淘汰變異的圓球莖。變異的圓球莖表面只是光滑一片,沒有芽尖,不能分化出芽苗。當圓球莖繼代到所需數量時,直接將完整的圓球莖轉移到新鮮的增殖培養基中,不要縱切分割,也不要切除芽尖,讓圓球莖表面的芽尖直接分化萌發為小苗。

  三、生根與煉苗當苗長至3厘米高、有2~3片葉時,即可將苗小心切離基部,轉入壯苗生根培養基中,然后將其置于培養室中培養,培養溫度25℃~28℃,光照強度5000~6000勒克斯,光照時間每天12小時,20天左右開始生根,35天可進行煉苗。大花蕙蘭瓶苗移栽前先移入遮陽棚內,在自然散射光下(7000~8000勒克斯),光照時間每天8~12小時的環境中放置15~20天,可明顯提高瓶苗的質量和栽植成活率。當瓶苗葉色濃綠、葉片堅挺、植株健壯時,即可出瓶移栽。

 
  
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