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如何使用反向移液技術(shù)更精準的移取蛋白溶

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2011-08-18  來源:現(xiàn)代實驗室裝備網(wǎng)
核心提示: 如何使用反向移液技術(shù)更精準的移取蛋白溶液
每支移液器的液程通常都用純水和正向移液技術(shù)校準過。因此我們推薦使用正向移液技術(shù)移取水性溶液,如緩沖液,稀釋酸或堿。當移取不同于水的液體時,由于具有不同的液體特性,其移液量可能偏離所選的量程。比如一些生物溶液的移液,可能會在移液器尖端或試管中產(chǎn)生氣泡或泡沫,這將使移液量產(chǎn)生偏差。在這種情況下,我們推薦使用反向移液技術(shù)移取高粘度或者容易產(chǎn)生泡沫的液體。反向移液技術(shù)減少了噴濺,泡沫和氣泡形成。這種方法尤其適用于移取小體積的液體。
下面先介紹一下正向移液和反向移液技術(shù)的操作。
1.將按鈕壓至第一停點。
2.將吸頭浸入液面下1cm處,緩慢釋放按鈕使其滑回原位。將吸頭從液體中移出,接觸容器邊緣除去多余的液體。
3.排液時,吸頭緊貼容器壁先輕按按鈕至第一停點,略作停頓后, 將按鈕按至第二停點(這個操作會將吸頭內(nèi)的液體徹底排盡),將吸頭從容器中沿容器壁移出。
4.松開按鈕至準備位置。
1.將按鈕壓至第二停點。
2.將吸頭浸入液面1cm處,緩慢釋放按鈕使其滑回原位。這將時液體充滿吸頭。將吸頭從液體中取 出,接觸容器邊緣去掉多余液體。
3.放液到接收容器時平穩(wěn)地輕按按鈕至第一停點。保持在這個位置。一些液體會殘留在吸頭中不能被放出。
4.殘留在吸頭內(nèi)的液體能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟棄。
5.松開按鈕到準備位置。
選擇合適的移液器對于微量移液的精準性也很重要,Thermo Scientific F系列移液器的超強吹出設(shè)計則滿足了微量移液對精準性的需求。低于50μl液程的Thermo F系列移液器均采用雙活塞設(shè)計,與其它普通移液器相比,其空氣吹出能力增大50%-60%,因此在小體積的液體吹出時會非常干凈完全,大大提高了移液的精準性。
我們使用Thermo Scientific Finnpipette F2 1-10 μl移液器,配合Thermo Scientific Finntip Flex 10吸頭,同時分別使用正向移液和反向移液,移取1%牛血清白蛋白(BSA,Sigma A7030)進行移液精準性測試。
圖1 表明當使用反向移液技術(shù)時,移液量的變化比使用正向移液技術(shù)處于更狹窄的一個范圍。

圖2 表明使用兩種移液方式的不精確度。不精確度是估量移液的重復(fù)性的。反向移液技術(shù)可以使不精確度相對于正向移液技術(shù)降低50%。
這是因為,BSA溶液含有易被疏水移液器吸頭壁吸附的疏水成分。當使用正向移液技術(shù)時,每次移液后少量的液體易殘留在吸頭中。這種趨勢會增加吹出液體體積之間的偏差,因為當重復(fù)移液時吸頭中累積的殘余液體可能增加下一次移液的移液量。而反向移液技術(shù)中有額外的液體被吸入吸頭中,這些額外的液體作用似一個蓄水池它使連續(xù)移液的移液量均等。這個蓄水池也能阻止空氣在吹出液體的最后從吸頭口進入,這樣可以降低液體起泡的可能性。這使反向移液技術(shù)在移取小液量液體時尤其有用。由此可見,選擇Thermo Scientific F2移液器,同時配合反向移液技術(shù),可較好的提高移取蛋白溶液的精確度和重復(fù)性。
這是個移液器的王國,每個人都能找到最適合自己的移液器。這是一個富于創(chuàng)新的品牌,傳承40年移液器的深厚底蘊。“先鋒源于創(chuàng)新,全新精準體驗”是賽默飛世爾科技移液器的真實寫照。Thermo Scientific Finnpipette的歷史可追溯到1971年,憑借著以人為本的設(shè)計理念,堅持不斷創(chuàng)新,締造了許許多多世界“第一”的記錄。我們推出了全球第一支連續(xù)可調(diào)微量移液器、第一支多道移液器、第一支可整支高壓消毒的移液器、第一支彩色標記移液器。Finnpipette特別重視客戶反饋,不斷努力改善產(chǎn)品。我們始終追求提高性能、精準性和客戶滿意度。更多Thermo Scientific移液解決方案請查看:Thermo移液器。
編輯:songjiajie2010

 
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