移液槍是實驗室最常用的儀器之一,是實驗室不可或缺的基礎實驗儀器。
移液槍多少會影響一些精密實驗的數據質量,細節(jié)決定成敗,今天在這里跟大家普及一下移液槍的使用規(guī)程及注意事項,希望對大家以后的實驗有幫助。
移液槍的結構及使用前檢查
移液槍在使用前,應進行使用前檢查:
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檢查刻度是否在最大值
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旋轉旋鈕,檢查讀數是否準確
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外觀是否干凈
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按動按鈕檢查是否順暢或者有噪音
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校對調整移液槍
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使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內
移液槍的使用
1、首先確定移液體積,選擇合適量程的移液槍
移液槍吸頭一般分為白,黃,藍三種,其中0.1-2.5 ul,0.5-10 ul,2-20 ul使用白吸頭;5-50 ul,10-100 ul,20-200 ul使用黃吸頭;100-1000 ul使用藍吸頭。
大多數情況下移液槍不同顏色的控制按鈕對應不同的槍頭顏色,這是防止實驗人員按錯槍頭的小方法。
2、容量設定
手柄的顯示窗口確定移液槍的移液量,旋轉控制旋鈕設置量程。
從大量程調節(jié)至小量程為正常調節(jié)方法,逆時針旋轉刻度即可從小量程調節(jié)至大量程時,應先調至超過設定體積刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證移液槍的精確度。
3、安裝吸頭
將移液槍頂端插入吸頭,在輕輕用力下壓的同時,輕微轉動上緊即可。
注意將移液槍垂直插入吸頭,用移液槍撞擊吸頭的方法是非常不可取的,長期這樣操作回導致移液槍的零件因撞擊而松散,嚴重會導致調節(jié)刻度的旋鈕卡住。
4、吸液
吸液前吸頭先在液體中預潤洗,慢吸慢放,把控制按鈕壓至第一停點,吸頭尖端浸入液面3 mm以下,垂直吸液,緩慢平穩(wěn)松開按鈕,吸入液體,再將吸頭提離液面。
正確的入液深度較多可使準確度提高5%。微量移液槍的吸頭入液深度應當為1-2 mm,大量程移液槍的吸頭入液深度較高為3-6 mm,具體取決于吸頭大小。
如果吸頭入液太深,那么吸頭中的氣壓會增大,導致吸入過多的液體。
5、放液
放液時,將吸頭緊貼容器內壁,把控制按鈕壓到第二停點,將全部液體排出。
放液時如果量很小則應吸頭尖端可靠容器內壁。吸有液體的移液槍不應平放,吸頭內的液體很容易污染槍內部而可能導致槍的彈簧生銹。
移液槍吸頭在樣品中的入液角度應當盡量接近90度,與垂直方向偏離不超過20度。角度太大可能導致吸頭中吸入太多的液體,造成吸液不準確。
例如,在與垂直方向呈30度角時,可過多吸入達0.7%的液體。
5、退卸吸頭
卸去吸頭,用吸頭卸卻按鈕卸去,將吸頭打入廢液缸。
移液槍的使用注意事項
1、移液槍在每次實驗后應將刻度調至最大,讓彈簧回復原型,延長移液槍的使用壽命。
2、吸取液體時不允許突然松開,要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,否則溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。
4、濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節(jié)旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。
5、可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。
6、在設置量程時,請注意旋轉到所需量程數字清清楚楚在顯示窗中,所設量程在移液槍量程范圍內不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液槍。
7、移液槍嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
8、在進行高精度試驗時,遇到粘度較大的液體,移液槍禁止快速吹打混勻液體,會產生誤差。
10、如果進行RNA提取相關操作,事先用RNAzap進行除酶,并照射紫外30 min-1h,如果進行細胞相關實驗,請在使用前后照射紫外30 min-1h,并在使用前用75%乙醇擦拭。注意酒精棉球不可太濕,酒精流吸頭內會影響槍頭氣密性,并污染內容物。
11、所有的樣品之間都應保持一致的移液節(jié)奏。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液過程中每個步驟的節(jié)奏。