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地高辛配基隨機標記DNA探針試劑盒成份

放大字體  縮小字體 發布日期:2005-11-18  瀏覽次數:1474
  1.無標記對照DNA1 此管內有20μl pBR328 DNA100μg/ml,pBR328分別用BamHⅠ,BglⅠt HinfⅠ消化,它們的混合比例為2:3:3,共有16個Pbr328片段,這些片段的大小分別為:4907,2176,1766,1230,1033,653,517,453,298,234,234,220和154×2bp。
  2.無標記對照DNA2 此管內有20μl pBR328 DNA200μg/ml,已用EcoRⅠ線性化。
  3.DNA稀釋緩沖液 有兩管,每管1ml[成分為:Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]內含鮭魚精DNA(50μg/ml)。
  4.標記對照DNA 此管內有50μl線性化pBR328DNA,按標記方法已標記有地高辛配基dUTP,含20μg模板DNA,每毫升含5μg合成的標記DNA。
  5.六聚核苷酸混合物
  6.標記用混合底物 此管內有50μl 10倍濃度的dNTP標記用混合底物,含dATP(1mmol/L)dCTP(1mmol/L),dGTP(1mmol/L),dTTP(0.65mmol/L)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。
  7.DNA聚合酶Ⅰ大片段(標記級) 此管內有25μl DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow),2U/μl。
  8.(Dig)AP結合物 此管內有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段,結合有堿性磷酸酶750U/ml。
  9.NBT 有兩管,每管1.25ml,是溶于70%(V/V)二甲基甲酰胺的硝基藍四唑鹽溶液(75mg/ml)。
  10.X-磷酸鹽 有兩管,每管0.9ml,是溶于二甲基甲酰胺的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽的甲苯胺溶液(50mg/ml)。
  11.封阻試劑 有兩瓶,每瓶有50g粉劑。

 
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