ELISA檢測試劑盒使用指南 | ||
步驟 | 常見問題 | 解決方案 |
實驗準備 | 1 加樣器不準確;尤其10ul以下的加樣器,對結果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器最好采用進口產品(芬蘭、法國等); |
2 保溫設備不良; | 2 仔細校正溫度到37℃,水浴箱為佳; | |
3 洗滌用水不規范。 | 3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。 | |
4 認真閱讀使用說明書。 | ||
樣品加樣 | 1 加樣不準確; | 1 加樣時一定要仔細。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。 |
2 沒有混勻。 | 2 加樣后,反復抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導致非特異性吸附。 | |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應靜止30秒鐘; |
2 選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內水分; | ||
3 可選用塑料洗滌瓶。 | ||
加酶反應 | 漏加 | 滴加后,認真檢查各孔 |
結果判斷 | 1 包括陰性對照孔在內,各孔顯色普遍偏深; | 1 可能是洗滌不充分;加樣過量;溫育時間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善,可與生產廠家聯系; |
2 包括陽性對照在內,各孔均無顯色; | 2 可能是漏加樣本或酶液;溫育時間過短溫度過低;試劑保存不當活性下降;按說明書重新操作。如無改善,可與生產廠家聯系; | |
3 陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常; | 3 陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善,可與廠家聯系,索要對照品; | |
4 有些標本顯色不深,判斷陽性困難。 | 4 重新操作。最好使用酶標儀,測定光吸收度,按P/N值標準判斷。 | |
試劑保存 | 保存不規范 | 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對照品 | 對照品為凍干品 | 按對照管標示,加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶,充分溶解混勻。可按說明書使用。 |