四環素類(TCs)ELISA檢測試劑盒:
四環素檢測試劑盒是應用ELISA技術研發而成的檢測產品,能最大限度地減少操作誤差和工作強度。四環素檢測試劑盒可定性、定量檢測,本試劑盒適用于蜂蜜、牛奶、組織(含水產)中四環素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環素類藥物的殘留檢測。
一、概要
四環素類藥物(Tetracyclines,TCs)是以四并苯為母核的一族抗生素,其中四環素、土霉素、金霉素及多西環素以其優良的抗菌性、穩定的藥性及低廉的價格,在畜牧業生產中廣泛用于疾病的治療和預防及促進生長。但該類藥物過量使用會導致畜產品中高濃度藥物殘留,直接影響消費者身體健康。
高效液相色譜法目前是分析四環素類藥物殘留量的主要方法,但需要一系列繁瑣的提取和凈化處理步驟,而且存在回收率低,雜質干擾大等問題。
二、試驗原理
四環素檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被四環素類藥物抗原,樣本殘留的四環素類藥物和微孔條上預包被的抗原競爭抗四環素類藥物抗體,加入酶標二抗,經TMB底物顯色,樣本吸光度值與其殘留物四環素類藥物呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣品中四環素類藥物的含量。
三、交叉反應率
四環素…………………………………………………100%
強力霉素…………………………………………………100%
金霉素……………………………………………………60%
土霉素………………………………………………………80%
四、檢測方法靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度:0.05ppb
樣本最低檢測限:
蜂蜜………………………………………………………3ppb
牛奶………………………………………………………5ppb
組織(含水產)……………………………………………3ppb
回收率:
蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±15%
組織(含水產)…………………………………………75±15%
精密度:試劑盒的變異系數均小于10%
五、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到30min(或更長)。反之,則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象,請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
六、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產品有效期為12個月。