一、目的:
建立Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,以保證Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)的正確使用。
二、范圍:
適用于Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)操作的全部行為。
三、責(zé)任:
中心化驗(yàn)室對(duì)本SOP的實(shí)施全面負(fù)責(zé)。
四、內(nèi)容:
4.1測(cè)定前的準(zhǔn)備工作
4.1.1接通電源并將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“ON”位置,依次打開(kāi)顯示器、打印機(jī)及電腦主機(jī)進(jìn)入Windows桌面。
4.1.2將儀器電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“I”位置,儀器開(kāi)始自檢,自檢完畢后,預(yù)熱30分鐘左右再進(jìn)行測(cè)定。
4.2吸收光譜測(cè)定
4.2.1參數(shù)設(shè)置 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Scan圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Scan控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,對(duì)掃描起始波長(zhǎng)和終止波長(zhǎng)、測(cè)定量程方式、掃描控制參數(shù)、基線控制參數(shù)、是否參照掃描、是否打印參數(shù)等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,待所需參數(shù)均設(shè)定好后應(yīng)檢查1次,以確認(rèn)所有參數(shù)均已正確設(shè)定,按OK鍵。
4.2.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,關(guān)緊樣品室門。在Scan控制界面上按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢按Start鍵,出現(xiàn)Save AS子菜單,在file name目錄里輸入樣品名,按Save鍵,出現(xiàn)Sample name屏幕,按OK鍵,儀器進(jìn)行掃描。掃描完畢按Print鍵打印結(jié)果。
4.3單波長(zhǎng)數(shù)據(jù)測(cè)定
4.3.1參數(shù)設(shè)置 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Simple Read圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Simple Read控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在Read at Wavelength選項(xiàng)里設(shè)定所需波長(zhǎng);在Ave Time(sec)選項(xiàng)里設(shè)定讀信號(hào)時(shí)間;在SWB選項(xiàng)里設(shè)定光譜帶寬;在Y Mode選項(xiàng)里設(shè)定測(cè)定量程方式;以吸收度顯示選ABS等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,待所需參數(shù)均設(shè)定好后應(yīng)檢查1次,以確認(rèn)所有參數(shù)均已正確設(shè)定,按OK鍵。
4.3.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,關(guān)緊樣品室門。按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢后在Simple Read控制界面上按Read鍵即自動(dòng)讀出測(cè)定結(jié)果,按Print鍵打印樣品結(jié)果。
4.4標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定
4.4.1設(shè)置參數(shù) 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Concentration圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Concentration控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需要求,對(duì)測(cè)定波長(zhǎng)設(shè)定、對(duì)測(cè)定光譜帶寬、測(cè)定量程方式、曲線建立方法、標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)量、標(biāo)準(zhǔn)品濃度、樣品數(shù)量、測(cè)量值單位、打印參數(shù)等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,參數(shù)設(shè)定完畢,按OK鍵。
4.4.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢后,在Concentration控制界面上按Start鍵,進(jìn)入Standard/Sample Selection控制界面,按OK鍵,出現(xiàn)Save AS子菜單,在file name目錄里輸入標(biāo)準(zhǔn)品名,按Save鍵,出現(xiàn)Present Standard控制界面,按OK鍵。依次放入盛以由低濃度至高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的比色皿至“2”號(hào)位置,儀器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定并分析。
4.4.3標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)完畢后,換上待測(cè)樣品溶液,按OK鍵,儀器將自動(dòng)讀出測(cè)定結(jié)果。按Print鍵打印測(cè)定結(jié)果。
4.5樣品加溫功能
樣品如需加溫,則可使用此功能。將加溫控制器電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“I”位置,接通泵的電源并把水泵放入預(yù)先裝滿2/3體積水的500ml燒杯里。在加溫控制器的控制屏幕上按UP鍵或DOWN鍵設(shè)定所需溫度即可。
4.6關(guān)機(jī)
取出比色皿冼凈,依次關(guān)掉電腦主機(jī)、顯示器、打印機(jī)及儀器電源開(kāi)關(guān),拔掉電源插頭。
4.7注意事項(xiàng)
4.7.1比色皿使用完畢,立即用蒸餾水或有機(jī)溶液沖洗干凈,并用柔軟清潔的紗布把水漬擦凈,以防表面光潔受損,影響正常使用。
4.7.2使用的比色皿必須潔凈并保持樣品室的潔凈,否則會(huì)產(chǎn)生測(cè)量誤差。
4.7.3供試品溶液的吸收讀在0.3~0.7之間為宜,在此范圍誤差較小。
4.7.4設(shè)定的參數(shù)不恰當(dāng)易得到不良的結(jié)果或圖譜,如狹縫太寬使吸收值降低,分辨率下降;狹縫太窄則出現(xiàn)過(guò)大的噪音,使讀數(shù)不準(zhǔn)確。
4.7.5測(cè)定時(shí)注意樣品室門應(yīng)關(guān)緊,否則引入過(guò)多的雜散光,使吸收度讀數(shù)下降。
建立Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,以保證Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)的正確使用。
二、范圍:
適用于Varian cary 100型紫外分光光度計(jì)操作的全部行為。
三、責(zé)任:
中心化驗(yàn)室對(duì)本SOP的實(shí)施全面負(fù)責(zé)。
四、內(nèi)容:
4.1測(cè)定前的準(zhǔn)備工作
4.1.1接通電源并將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“ON”位置,依次打開(kāi)顯示器、打印機(jī)及電腦主機(jī)進(jìn)入Windows桌面。
4.1.2將儀器電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“I”位置,儀器開(kāi)始自檢,自檢完畢后,預(yù)熱30分鐘左右再進(jìn)行測(cè)定。
4.2吸收光譜測(cè)定
4.2.1參數(shù)設(shè)置 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Scan圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Scan控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,對(duì)掃描起始波長(zhǎng)和終止波長(zhǎng)、測(cè)定量程方式、掃描控制參數(shù)、基線控制參數(shù)、是否參照掃描、是否打印參數(shù)等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,待所需參數(shù)均設(shè)定好后應(yīng)檢查1次,以確認(rèn)所有參數(shù)均已正確設(shè)定,按OK鍵。
4.2.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,關(guān)緊樣品室門。在Scan控制界面上按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢按Start鍵,出現(xiàn)Save AS子菜單,在file name目錄里輸入樣品名,按Save鍵,出現(xiàn)Sample name屏幕,按OK鍵,儀器進(jìn)行掃描。掃描完畢按Print鍵打印結(jié)果。
4.3單波長(zhǎng)數(shù)據(jù)測(cè)定
4.3.1參數(shù)設(shè)置 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Simple Read圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Simple Read控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在Read at Wavelength選項(xiàng)里設(shè)定所需波長(zhǎng);在Ave Time(sec)選項(xiàng)里設(shè)定讀信號(hào)時(shí)間;在SWB選項(xiàng)里設(shè)定光譜帶寬;在Y Mode選項(xiàng)里設(shè)定測(cè)定量程方式;以吸收度顯示選ABS等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,待所需參數(shù)均設(shè)定好后應(yīng)檢查1次,以確認(rèn)所有參數(shù)均已正確設(shè)定,按OK鍵。
4.3.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,關(guān)緊樣品室門。按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢后在Simple Read控制界面上按Read鍵即自動(dòng)讀出測(cè)定結(jié)果,按Print鍵打印樣品結(jié)果。
4.4標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定
4.4.1設(shè)置參數(shù) 在Windows桌面上用鼠標(biāo)雙擊Cary winUV圖標(biāo),進(jìn)入Cary winUV子菜單選擇Concentration圖標(biāo)并雙擊,進(jìn)入Concentration控制界面。按Setup鍵,屏幕顯示參數(shù)設(shè)定條件表,根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需要求,對(duì)測(cè)定波長(zhǎng)設(shè)定、對(duì)測(cè)定光譜帶寬、測(cè)定量程方式、曲線建立方法、標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)量、標(biāo)準(zhǔn)品濃度、樣品數(shù)量、測(cè)量值單位、打印參數(shù)等逐項(xiàng)進(jìn)行設(shè)定或改變,參數(shù)設(shè)定完畢,按OK鍵。
4.4.2將盛以對(duì)照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號(hào)位置,盛以最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液的比色皿放入“2”號(hào)位置,按Zero鍵調(diào)零,調(diào)零完畢后,在Concentration控制界面上按Start鍵,進(jìn)入Standard/Sample Selection控制界面,按OK鍵,出現(xiàn)Save AS子菜單,在file name目錄里輸入標(biāo)準(zhǔn)品名,按Save鍵,出現(xiàn)Present Standard控制界面,按OK鍵。依次放入盛以由低濃度至高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的比色皿至“2”號(hào)位置,儀器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定并分析。
4.4.3標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)完畢后,換上待測(cè)樣品溶液,按OK鍵,儀器將自動(dòng)讀出測(cè)定結(jié)果。按Print鍵打印測(cè)定結(jié)果。
4.5樣品加溫功能
樣品如需加溫,則可使用此功能。將加溫控制器電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)至“I”位置,接通泵的電源并把水泵放入預(yù)先裝滿2/3體積水的500ml燒杯里。在加溫控制器的控制屏幕上按UP鍵或DOWN鍵設(shè)定所需溫度即可。
4.6關(guān)機(jī)
取出比色皿冼凈,依次關(guān)掉電腦主機(jī)、顯示器、打印機(jī)及儀器電源開(kāi)關(guān),拔掉電源插頭。
4.7注意事項(xiàng)
4.7.1比色皿使用完畢,立即用蒸餾水或有機(jī)溶液沖洗干凈,并用柔軟清潔的紗布把水漬擦凈,以防表面光潔受損,影響正常使用。
4.7.2使用的比色皿必須潔凈并保持樣品室的潔凈,否則會(huì)產(chǎn)生測(cè)量誤差。
4.7.3供試品溶液的吸收讀在0.3~0.7之間為宜,在此范圍誤差較小。
4.7.4設(shè)定的參數(shù)不恰當(dāng)易得到不良的結(jié)果或圖譜,如狹縫太寬使吸收值降低,分辨率下降;狹縫太窄則出現(xiàn)過(guò)大的噪音,使讀數(shù)不準(zhǔn)確。
4.7.5測(cè)定時(shí)注意樣品室門應(yīng)關(guān)緊,否則引入過(guò)多的雜散光,使吸收度讀數(shù)下降。