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835氨基酸分析儀使用調(diào)試技術(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-12-14  來(lái)源:丁香通
核心提示:835氨基酸分析儀使用調(diào)試技術(shù)

一、儀器安裝調(diào)試

儀器安裝最好外接穩(wěn)壓器,安裝安全閘防止突然停電造成難以排除的故障。還要安裝銅板地線,這樣可使峰譜線穩(wěn)定。儀器各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)的調(diào)試采用18種氨基酸混合標(biāo)樣(日本和光試劑公司H型氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)液)。

1.  基酸分辨率的檢測(cè)該儀器要求蘇一絲氨基酸分辨率為70%以上,甘-丙氨基酸分辨率為80%以上,采用5個(gè)標(biāo)樣經(jīng)檢測(cè)蘇-絲氨基酸分辨率為85%以上,甘一丙氨基酸分辨率為以95%上(試驗(yàn)數(shù)據(jù)表略)。

2.  氨基酸峰位重現(xiàn)性檢測(cè):5個(gè)標(biāo)樣連續(xù)多次檢測(cè),丙氨酸最高和最低出峰保留時(shí)間不超過(guò)1分鐘,精氨酸出峰時(shí)間最高和最低偏差在1%以內(nèi)(試驗(yàn)數(shù)據(jù)表略)。

3.  氨基酸蜂面積重現(xiàn)性檢測(cè):5個(gè)標(biāo)樣、經(jīng)多次檢測(cè)甘氨酸和丙氨酸峰面積重現(xiàn)性編差平均值均達(dá)儀器指標(biāo)2.5%以下(數(shù)據(jù)表略)。

4.  儀器重復(fù)性檢測(cè):儀器分離柱重新裝樹(shù)脂后,對(duì)10個(gè)標(biāo)樣進(jìn)行檢測(cè),,17種氨基酸(不包括氨峰)的出峰保留時(shí)間(t)和峰面積(A)的變異系數(shù)(CV)值列表1。

表1看出種17氨基酸值均在以1%內(nèi),說(shuō)明各種氨基酸峰面積再現(xiàn)性較好,儀器重復(fù)性好。

二、不同樣品氨基酸含里測(cè)定

1.  儀器檢測(cè)原理和方法:該分析儀不銹鋼分離柱內(nèi)裝有專利2619混合離子交換樹(shù)酯(Hitachi Cuiuomion-Exchange Resin),根據(jù)離子吸附交換的原理,,樣品用6摩爾鹽酸水介法處理后,經(jīng)自動(dòng)進(jìn)樣器定量,然后進(jìn)入分離柱,用流量穩(wěn)定的泵1輸送規(guī)定的緩沖液,按事先編好的程序卡規(guī)定的程序自動(dòng)淋洗,樣品水介后的酸性、中性和堿性氨基酸分別從分離柱上被洗脫下來(lái),各種氨基酸分次與泵2輸送的茚三酮顯色液在混合器中充分混合,在溫度為100℃左右的反應(yīng)浴中進(jìn)行顯色,生成紫色色素Dikepohydrindlidene Dikerohydrinaomine(DrDA),此紫色發(fā)色液經(jīng)單色分離器的分光光度計(jì),用570 納米和440 納米兩個(gè)注長(zhǎng)連續(xù)檢測(cè),得到的吸光度進(jìn)行信號(hào)放大,記錄儀自動(dòng)繪出各神氨基酸峰譜,以標(biāo)準(zhǔn)氨基酸峰譜為基準(zhǔn),采用峰面極H·W 法進(jìn)行結(jié)果計(jì)算,或通過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行計(jì)算打印,得出各種氨基酸含量。

2.  分析結(jié)果:為了檢測(cè)儀器的穩(wěn)定性,選用了各種不同樣品20個(gè),進(jìn)行氨基酸含量的測(cè)試,測(cè)定數(shù)據(jù)列表2。

表2 數(shù)據(jù)是經(jīng)多次測(cè)定的結(jié)果,編差均在0.01~0.05以內(nèi),而且和其它氨基酸分析儀測(cè)定的數(shù)據(jù)相比較結(jié)果基本一致。
 

編輯:songjiajie2010

 
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