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制備型高效液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備高效液相色譜，而是依據(jù)分離目的來決定。與分析液相不同，制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進行提取和純化。
與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾、萃取）比較，制備液相是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴大發(fā)展。
制備液相與分析液相的區(qū)別
和制備液相對應(yīng)的，是分析液相。它們的最大差別，不在于外形，而在于目的。分析液相的目的當然是為了分析樣品，有什么成分，含量多少，也叫做定性定量。要做好分析液相，最關(guān)注的是分離度和靈敏度，要分得開，測得到，測得準。而制備液相是利用色譜柱的分離能力，來去除雜質(zhì)，得到高純樣品。為什么強調(diào)純度呢？
在實驗室里，紅外、紫外、核磁這些儀器，都要求樣品達到足夠的純度，才能得到準確的結(jié)果。除了實驗室，藥品的生產(chǎn)也需要純化，特別是生物制品和藥劑。很多生物制品如果是直接吃下去，跟吃個雞蛋也沒什么不同，直接注射才能保留活性成份。而注射治療，藥物會直接進入血液，所以純度非常重要。在實驗室里，用于制備的液相，配置和普通的分析液相差不多。有泵，有進樣器，有柱子，有檢測器。為了收集分離出來的化合物，制備液相通常還配一個餾分收集器。餾分收集器就像液相色譜的收納盒，把每次分析的同類物質(zhì)收納到一起。餾分收集器可以直接串聯(lián)在檢測器后面。也可以連接一個三通，和檢測器并聯(lián)，都接在色譜柱的后面。有些實驗室里需要收集的量很大，一個餾分收集器裝不完，還可以并聯(lián)好幾個。根據(jù)檢測器的信號顯示，當化合物出峰的時候，儀器會自動收集。一般按照時間編程，也可以根據(jù)檢測器的信號強度自動觸發(fā)。一個個化合物通過餾分收集器收集到小瓶或者試管里，也可以通過管路連接到更大的瓶子。
制備液相有很多種分類方法，比如按壓力分類，或者按產(chǎn)量分類，彼此之間有交叉，沒有明確的標準。不同類型的制備液相有著不同的特點。比如這根用在生產(chǎn)上的制備液相柱，模樣和實驗室里有些不同。僅僅內(nèi)徑就有1.6m，色譜柱的重量有36噸重，每天消耗的流動相能放滿半個小游泳池。除了特別大的，還有特別小的。比如微克級制備，也常被稱為微量制備，它的有趣之處在于微量餾分收集器，可以直接使用MALDI點樣板。
制備色譜柱的材質(zhì)及其特點
各種規(guī)格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到，而且價格低廉，但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小，且非常容易破碎。當由于壓力太小而導(dǎo)致流動相流速很慢的時候，高位液面或加高壓空氣（或者氮氣）的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空，也能在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能，但其價格相對很貴。如果，只有很小的分離任務(wù)且經(jīng)費也允許，市面上直徑為1cm的小型制備柱就是首選。有機玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕，相對不銹鋼柱子而言，它是半透明的，可以看到液體的運行狀態(tài)，對有色的物質(zhì)其特點就更為突出。
裝柱方法的選擇
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大，顆粒度的減少會導(dǎo)致裝柱的難度。一般來說，顆粒直徑小于20－30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊－裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀松的 固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成。然而，當柱直徑大于20mm，所加壓力為30－40bar時，高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術(shù)。這種方法，先將固定相懸漿（或偶爾是干填充物）裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設(shè)備，在柱子填完后，應(yīng)用有柱效的測量，對柱效低的柱子應(yīng)該重填。
流動相的選擇
除了和分析色譜同樣的考慮外，在選用流動相時，要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作。一般來說，不宜采用高毒性溶劑，對多元溶劑要盡可能的少用。如果產(chǎn)品中含有大量溶劑，溶劑的純度也要考慮在其中。
組分保留時間的估計
用分析柱子在同等色譜條件下（同樣的固定相和流動相）測定保留時間后，按照單一組分的線流速（不是體積流速）一定，通過計算可以知道組分的大致保留時間區(qū)域。分析譜圖的峰形狀，對確定保留時間也有很大的參考價值。
產(chǎn)品的收集
手工餾分收集費時費力，自動餾分收集器有很大的方便。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術(shù)與非線性效用
在制備色譜中，因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度，可以在一定范圍內(nèi)大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候，也有一些分析色譜的時候，不能用到的技巧。因為篇幅關(guān)系，不在這里敘述。
柱轉(zhuǎn)換技術(shù)
通過接頭或者閥門，實現(xiàn)柱子的簡單延長，或者比較方便地實現(xiàn)對其中一個（或幾個）組分的精制。
新制備技術(shù)
模擬移動床可以連續(xù)進樣，并可以利用邊緣切割效用，而且采用了柱切換技術(shù)，能更好的利用溶劑和填料，已經(jīng)應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。其理論和技術(shù)也日益完善。迎頭色譜、超臨界流體色譜、逆流色譜環(huán)形色譜、氣相制備色譜等在科研和工業(yè)生產(chǎn)中也得到了應(yīng)用。
文章（文字）來源：色譜學(xué)堂等網(wǎng)絡(luò)
與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾、萃取）比較，制備液相是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴大發(fā)展。
制備液相與分析液相的區(qū)別
和制備液相對應(yīng)的，是分析液相。它們的最大差別，不在于外形，而在于目的。分析液相的目的當然是為了分析樣品，有什么成分，含量多少，也叫做定性定量。要做好分析液相，最關(guān)注的是分離度和靈敏度，要分得開，測得到，測得準。而制備液相是利用色譜柱的分離能力，來去除雜質(zhì)，得到高純樣品。為什么強調(diào)純度呢？
在實驗室里，紅外、紫外、核磁這些儀器，都要求樣品達到足夠的純度，才能得到準確的結(jié)果。除了實驗室，藥品的生產(chǎn)也需要純化，特別是生物制品和藥劑。很多生物制品如果是直接吃下去，跟吃個雞蛋也沒什么不同，直接注射才能保留活性成份。而注射治療，藥物會直接進入血液，所以純度非常重要。在實驗室里，用于制備的液相，配置和普通的分析液相差不多。有泵，有進樣器，有柱子，有檢測器。為了收集分離出來的化合物，制備液相通常還配一個餾分收集器。餾分收集器就像液相色譜的收納盒，把每次分析的同類物質(zhì)收納到一起。餾分收集器可以直接串聯(lián)在檢測器后面。也可以連接一個三通，和檢測器并聯(lián)，都接在色譜柱的后面。有些實驗室里需要收集的量很大，一個餾分收集器裝不完，還可以并聯(lián)好幾個。根據(jù)檢測器的信號顯示，當化合物出峰的時候，儀器會自動收集。一般按照時間編程，也可以根據(jù)檢測器的信號強度自動觸發(fā)。一個個化合物通過餾分收集器收集到小瓶或者試管里，也可以通過管路連接到更大的瓶子。
制備液相有很多種分類方法，比如按壓力分類，或者按產(chǎn)量分類，彼此之間有交叉，沒有明確的標準。不同類型的制備液相有著不同的特點。比如這根用在生產(chǎn)上的制備液相柱，模樣和實驗室里有些不同。僅僅內(nèi)徑就有1.6m，色譜柱的重量有36噸重，每天消耗的流動相能放滿半個小游泳池。除了特別大的，還有特別小的。比如微克級制備，也常被稱為微量制備，它的有趣之處在于微量餾分收集器，可以直接使用MALDI點樣板。
制備色譜柱的材質(zhì)及其特點
各種規(guī)格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到，而且價格低廉，但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小，且非常容易破碎。當由于壓力太小而導(dǎo)致流動相流速很慢的時候，高位液面或加高壓空氣（或者氮氣）的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空，也能在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能，但其價格相對很貴。如果，只有很小的分離任務(wù)且經(jīng)費也允許，市面上直徑為1cm的小型制備柱就是首選。有機玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕，相對不銹鋼柱子而言，它是半透明的，可以看到液體的運行狀態(tài)，對有色的物質(zhì)其特點就更為突出。
裝柱方法的選擇
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大，顆粒度的減少會導(dǎo)致裝柱的難度。一般來說，顆粒直徑小于20－30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊－裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀松的 固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成。然而，當柱直徑大于20mm，所加壓力為30－40bar時，高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術(shù)。這種方法，先將固定相懸漿（或偶爾是干填充物）裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設(shè)備，在柱子填完后，應(yīng)用有柱效的測量，對柱效低的柱子應(yīng)該重填。
流動相的選擇
除了和分析色譜同樣的考慮外，在選用流動相時，要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作。一般來說，不宜采用高毒性溶劑，對多元溶劑要盡可能的少用。如果產(chǎn)品中含有大量溶劑，溶劑的純度也要考慮在其中。
組分保留時間的估計
用分析柱子在同等色譜條件下（同樣的固定相和流動相）測定保留時間后，按照單一組分的線流速（不是體積流速）一定，通過計算可以知道組分的大致保留時間區(qū)域。分析譜圖的峰形狀，對確定保留時間也有很大的參考價值。
產(chǎn)品的收集
手工餾分收集費時費力，自動餾分收集器有很大的方便。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術(shù)與非線性效用
在制備色譜中，因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度，可以在一定范圍內(nèi)大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候，也有一些分析色譜的時候，不能用到的技巧。因為篇幅關(guān)系，不在這里敘述。
柱轉(zhuǎn)換技術(shù)
通過接頭或者閥門，實現(xiàn)柱子的簡單延長，或者比較方便地實現(xiàn)對其中一個（或幾個）組分的精制。
新制備技術(shù)
模擬移動床可以連續(xù)進樣，并可以利用邊緣切割效用，而且采用了柱切換技術(shù)，能更好的利用溶劑和填料，已經(jīng)應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。其理論和技術(shù)也日益完善。迎頭色譜、超臨界流體色譜、逆流色譜環(huán)形色譜、氣相制備色譜等在科研和工業(yè)生產(chǎn)中也得到了應(yīng)用。
文章（文字）來源：色譜學(xué)堂等網(wǎng)絡(luò)
