在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

食品伙伴網服務號
當前位置: 首頁 » 儀器設備 » 理化檢測儀器 » 質譜分析儀器 » 正文

質譜定量的簡介和LC/MS監測的模式

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-11-18  來源:丁香通
核心提示:質譜定量的簡介和LC/MS監測的模式

使用質譜作小分子藥代動力學分析,即PK/MS。除此之外,這些同樣的原則也可用于生物基質中肽和蛋白的定量。
傳統上,在使用現代質譜定量之前,定量是用HPLC高效液相色譜和UV紫外檢測器實現的。HPLC 藥代動力學分析建立在保留時間、峰面積和紫外光譜性質的基礎上的。HPLC方法的缺點是靈敏度不夠、缺乏特異性。我們已經看到一些實例,一個化合物的確已經代謝了,然而保留時間和紫外光譜上,母離子和代謝物無法區分。這種缺少特異性的分析時不時會誤導研究者。所以在藥代動力學分析中,基于質譜的表征現在是一種新型的重要的工具。
質譜定量中已經被廣泛接受的方式是MS/MS定量。這種定量常通過三級四極桿或離子阱質譜實現。要求使用MS/MS的原因是:許多化合物有同樣的質量。當使用第一個維度即單級質譜MS去定量時,也會缺乏特異性,尤其是對于像血液那樣的復雜的基質。第二個維度的MS(即MS/MS)在大多數情況下,能夠提供唯一的斷裂。合并特異的母離子質量和唯一的碎片離子信息,可以選擇性地監測被定量的化合物。下面我們將討論獲得和可視化LC/MS數據的方法。
獲得和可視化LC/MS的數據,或稱為:質譜數據如何在一個LC/MS實驗中表達?
典型的方法,質譜被設置為掃描特定的質量范圍。在全掃描分析中,質量掃描范圍較寬;在選擇離子監測SIM時,質量掃描范圍較窄。依賴于掃描的類型,一個獨立的質量掃描時間可以從10 ms到5秒。在一次LC/MS分析中可獲得許多個掃描。LC/MS數據的表示方法為:把每個質量掃描的離子流信息疊加,畫出隨時間變化的總離子流,橫軸是時間,縱軸是強度。總離子流圖非常像HPLC的紫外圖,見圖1。

下面我們將討論各種掃描的模式,和這些模式同質譜定量的關系。
最常見的LC/MS數據模式為:
(1)   總離子流圖
(2)   選擇離子監測(SIM)
(3)   選擇反應監測(SRM)或多反應監測(MRM):MRM和SRM本質上是同樣的實驗模式。
全掃描分析
從藥代分析中得到的全質量范圍的總離子流圖(TIC)非常像HPLC UV圖,除了:質譜能檢測到更多的化合物,尤其是沒有紫外吸收的化合物。總離子流是一個疊加圖,疊加了每個質量掃描的離子流。當一個小分子或小肽流出HPLC色譜柱時,相對強度上升,在TIC圖上出現了一個峰,橫軸是時間。每個質量的化合物都被記錄在TIC圖上。找出感興趣的化合物可能是困難的,因為許多化合物有相同的質量。化合物的天然質量不是鑒定的唯一性數據。設置一個確定的質量,可以畫出一個提取離子流圖,但這個圖的強度會比下面介紹的SIM實驗中的強度低。
(注意:TIC指的是在一段時間內采集的質量掃描數據,不特指掃描范圍或質譜實驗的類型。例如,我們可以在SIM或SRM實驗中獲得TIC圖。然而,為簡單起見,我們將把這些圖稱為SIM和SRM圖,而不是SIM TIC圖。)
Selected Ion Monitoring選擇離子監測
在選擇離子監測中,質譜被設置為掃描一個非常小的質量范圍,典型的是一個質量數的寬度。選擇的質量寬度越窄,SIM的確定度越高。SIM圖就是從非常窄的質量范圍中得到的離子流圖。只有被該質量范圍選擇的化合物才會被畫在SIM圖中。圖1和圖2是同一個樣品的譜圖,然而它們看起來很不相同。原因是在SIM圖中,畫的是TIC圖中較少的組分。SIM圖是比TIC圖更確定的圖。

然而,SIM圖仍顯示了許多峰,不能唯一地確認我們感興趣的化合物。一個復雜的樣品(比如血清或血漿)中,這樣的圖是一個典型的SIM圖。許多化合物有同樣的質量,在ESI中還有多電荷峰也和我們感興趣的化合物有同樣的m/z值。SIM實驗比全掃描實驗更靈敏,因為質譜在一個更小的質量范圍上駐留(dwell)更長的時間。
Selected Reaction Monitoring選擇反應監測 (SRM)
SRM被大多數科學家在質譜定量中使用,見圖3。SRM中,可以監測一個特征的唯一的碎片離子,在很多非常復雜的基質中進行定量。SRM圖非常簡單,通常只包含一個峰。這種特征性使SRM圖成為靈敏度高且特異性強的理想的定量工具。

SRM的過程:選擇一個特征的母離子做MS/MS,在其碎片中選擇一個特征的子離子作為監測離子。可以把SRM理解為碎片離子的SIM。這種特征性的實驗被成為“transition”(躍遷)。

 

編輯:songjiajie2010

 
分享:
關鍵詞: 質譜定量 LC/MS監測
[ 網刊訂閱 ]  [ 儀器設備搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦儀器設備
點擊排行
 
 
Processed in 0.049 second(s), 18 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 人人澡 人人澡 人人看 | 午夜国产精品福利在线观看 | 二级黄的全免费视频 | 国产精品无码永久免费888 | 四虎精品成人a在线观看 | 一级片一级片一级片 | 色噜噜狠狠狠综合曰曰曰 | 韩国三级理论在线观看视频 | 久久国产乱子伦精品免费强 | 国产特级毛片aaaaaa毛片 | 欧美一级视频免费观看 | 人人玩人人添天天爽 | 国产成人啪午夜精品网站男同 | 欧美另类亚洲一区二区 | 在线免费观看视频黄 | 毛片大全免费 | 色狠狠一区二区 | 九九热精品在线视频 | 色在线视频观看 | 污视频日本| 成 人 在 线 免费 8888 www | brazzersvideosex欧美最 | 天堂网在线视频 | 羞羞色男人的天堂伊人久久 | 激情三级视频 | 亚洲午夜顶级嘿嘿嘿影院 | 国精视频一区二区视频 | 国产精品四虎在线观看免费 | luxu259在线中文字幕 | 午夜影视免费观看 | 国产精品综合色区在线观看 | 日本免费三级网站 | 永久免费看的啪啪网站 | 欧美黑粗 | 欧美一欧美一区二三区性 | 一本到中文字幕高清不卡在线 | 国产精品成人aaaaa网站 | 韩彩英三级无删版甜性涩爱 | 天堂中文最新版www 天堂资源8中文最新版在线 | 400部大量精品情侣网站 | 午夜一级免费视频 |