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各類培養(yǎng)箱的功能及區(qū)別-厭氧培養(yǎng)箱

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-04-10
核心提示: 厭氧手套箱(Anaerobie glove box)即厭氧培養(yǎng)箱,是迄今為止國際上公認(rèn)的培養(yǎng)厭氧菌佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱
 厭氧手套箱(Anaerobie glove box)即厭氧培養(yǎng)箱,是迄今為止國際上公認(rèn)的培養(yǎng)厭氧菌佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內(nèi)進行操作,故名。

箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關(guān)上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開,將物品移入箱內(nèi),關(guān)上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中殘余氧化合成水的原理。

該箱可調(diào)節(jié)溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細(xì)菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預(yù)還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均是自動調(diào)節(jié)。

1

結(jié)構(gòu)

共分為:厭氧室、傳輸艙、裸手袖套操作孔、氣路及電路控制系統(tǒng)四大部分。

    1、厭氧室

內(nèi)腔機械強制對流與內(nèi)腔正壓,實現(xiàn)恒溫、控濕、除氧、生物脫毒四方面狀態(tài)穩(wěn)定均一,并且快速恢復(fù),操作培養(yǎng)同室進行。

    2、傳輸艙

采用緊湊式筒狀設(shè)計,實現(xiàn)單人單手輕松轉(zhuǎn)移樣品。

    3、裸手袖套操作孔

無需進行抽真空/充氮置換過程,雙手可直進直出內(nèi)腔厭氧。

    4、控制系統(tǒng)

全方位實時狀態(tài)自檢報警功能,確保設(shè)備正常運行。

2

操作室厭氧環(huán)境形成

1.按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內(nèi)放入兩個無毒塑料袋。

2.混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調(diào)整,調(diào)節(jié)減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa。

3.打開設(shè)備后配,電源開關(guān)后,按控制牌上的總電源鍵,使設(shè)備通電。

4.操作室放入1000g鈀粒(密封),由冷凝系統(tǒng)除濕,并放入?yún)捬踔甘緞?/span>

5.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗(按控制面板上真空泵鍵,按一下開,再按一下關(guān))。

6.操作室內(nèi)第一次置換(氮氣置換):

①先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一個插入塑料袋。

②接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關(guān)閉電磁閥,然后扎緊袋口。

③把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

④把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸的放于操作室內(nèi),至全部放除。

7.操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。

8.操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H21/10% CO2/15%):

①調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。

②混合氣充滿塑料袋后,關(guān)閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計、調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。

③把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。

④通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)。

9.操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點潔凈水,1-2小時后,觀察其變色情況,反應(yīng)部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。

10.紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間自定。

3

菌種的置入和培養(yǎng)

1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。

2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。

3.取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。

4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。

5.取樣室外門開啟、關(guān)緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。

6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

①每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新?lián)Q氣。

②要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

③連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi),干燥2-3小時可使其復(fù)原)

7.接種棒滅菌器的應(yīng)用:

①隨時用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。

②熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

8.操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。

4

注意事項

1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。

2.開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。

3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到絕對厭氧環(huán)境后放入。

4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)

5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

6.調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體。

7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。

8.停止使用,關(guān)閉總電源鍵,及設(shè)備后部的電源開關(guān)。

5

臨床常見厭氧菌

 1、梭狀芽胞桿菌屬(Clostridium)

簡稱梭菌屬,常見致病菌有破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌和艱難梭菌,均為嚴(yán)格厭氧菌。其中產(chǎn)氣莢膜梭菌常引起氣性壞疽,且病程短、癥狀兇險;艱難梭菌常引起抗生素相關(guān)性腹瀉,極易因誤診而產(chǎn)生嚴(yán)重癥狀。

2、卟啉單胞菌屬(Porphyromonas Shah and Collins)

常見致病菌有牙齦卟啉單胞菌、牙髓卟啉單胞菌等,嚴(yán)格厭氧菌。其中牙齦卟啉單胞菌是牙周疾病的主要病原菌;牙髓卟啉單胞菌主要引起牙髓及根尖組織疾病。

3、念珠菌屬(candidiasis)

常見致病菌有白色念珠菌,厭氧菌。白色念珠菌口腔粘膜感染常引起口腔潰瘍,而其在陰道內(nèi)感染則是婦科疾病的主要起因。

4、乳酸桿菌屬(Lacticacid bacteria)

常見條件致病菌有嗜酸乳桿菌,厭氧菌。該菌為齲齒形成的主要原因,也是牙科主要防治菌之一。

5、螺桿菌屬(Helicobacter)

常見致病菌有幽門螺桿菌,微需氧菌。該菌為慢性胃炎和胃腸潰瘍的主要病原菌,也與原發(fā)性胃癌有密切關(guān)系。

6.彎曲菌屬(Campylobacter)

常見致病菌有空腸彎曲菌,微需氧菌。該菌為腸炎的重要病原菌之一,常因抗生素治療無效而延誤病情,產(chǎn)生嚴(yán)重后果。

編輯:songjiajie2010

 
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