組織學常規制片技術中最為廣泛應用的切片方法,為石蠟切片與冷凍切片。石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟,為永久性顯微玻片標本。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法。多應用于手術中的快速病理診斷。而且也被用于其他許多學科領域的研究中。
冷凍切片技術,是一種在低溫條件下使組織快速冷凍到一定的硬度,然后進行切片的一種方法。被稱為病理科的急診工作----在外科手術過程中,醫生切取部分腫瘤組織或其它病變標本,送檢到病理科通過快速冷凍標本制作切片,病理科診斷醫師對該切片進行觀察快速做出判斷得出良、惡性結果或某種疾病的診斷。
冷凍切片與常規石蠟切片區別下面小結:
1、制作方式不同:
①、冷凍切片要求送檢新鮮組織,采用低溫恒冷切片機,將取材組織置于-25℃冷凍箱內速凍3-5分鐘,切8微米厚度切片,固定后水洗直接染色,針對不同組織采用不同溫度進行切片。
②、石蠟切片--送檢組織用10%中性福爾馬林固定,標準取材后,置入全自動脫水機進行脫水、透明、浸蠟,再進行包埋、切片,厚度3-5微米,將切片烤片后,置入全自動染色機進行染色。
2、鏡下觀察不同:
①、冷凍切片---因為冷凍組織未經過固定是新鮮組織冷凍切片,沒有經過充分的脫水,對組織的觀察會有一定的影響,所以切片鏡下細胞、組織略顯腫脹,診斷準確率95%以上。
②、石蠟切片---因為組織塊經過10%中性福爾馬林固定,酒精梯度脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,所以切片平整、顏色鮮艷、細胞組織結構清晰可見,診斷準確率99%以上。
3、用途不同:
①、冷凍切片用于術中病理診斷,達到迅速做出診斷,包括良、惡性、切緣及淋巴結轉移情況。所以要求病理診斷醫師具有高年資病理診斷經驗,取材部位精準, 病理技術人員具有冰凍切片的經驗。
②、石蠟切片用于術后病理診斷,要求離體組織及時固定,保持組織原有結構及成分固定在原有位置,經過一系列技術處理,通過這些處理可以使得切片在顯微鏡下清晰的辨認其形態結構,組織細胞形態結構保存良好,可以幫助醫生更加準確的做出診斷。
由于冷凍切片存在質量和時間上的限制,冷凍切片病理診斷對腫瘤的分型不一定非常準確,對部分無法確定組織學類型的病/例,還需要等待常規的石蠟切片予以確診。冷凍切片較石蠟切片制作厚,做出來的切片沒有石蠟切片清晰。
總之,簡單概括起來,兩者之間最大區別是冰凍切片操作便捷性高,能很好保持抗原活性、脂肪、類脂成分。石蠟切片組織形態好,能切更大組織,切片厚度薄,連片性好,對標本的長期保存非常適合。