三角瓶配置好培養基(以五百毫升瓶子裝300mL培養基為例),加熱溶解,攪拌均勻,放入微波爐,調節火至大火或最高檔(根據加熱快慢選擇),設2分鐘,開始加熱,通過觀察窗觀察里面培養基變化(VRBA培養基開始會表面出現白沫,沸前變清。這個也不完全準,主要還是根據不同配方的培養基成分有關),一般二分鐘后是沒有變化的(根據培養基量的多少),然后繼續設2分,如此直至有少部分冒泡,這時候盯的要求比較緊,一旦有冒泡變多上漲趨勢(一般反應已在一厘米高度),馬上拉門(門一開,自動斷電和降溫),泡沫下降(記錄下前面2分鐘一次的累計時間,下一瓶設置時間可直接設置對應累積時間),調節檔至低一檔或低二檔,然后加熱,以能冒泡但又不厲害(防止沸出)為宜,反復關開門來維持煮沸狀態二分鐘,完成后,帶耐熱手套取出,蓋上封口用無菌紗布,皮筋扎口,放入恒溫用的46攝氏度水浴鍋中平衡溫度后使用。
注意:
注意:
1.瓶裝培養基的量,500mL瓶最多300mL,三角瓶口小,不宜過多。
2.下列東西不能放入微波爐:
錫箔紙;帶殼雞蛋;鐵材料;完整殼栗/榛子;蜜蜂牛奶/方便面;非微波塑料;未知物先百度。
3.操作微波爐要準備一副耐熱手套(取放瓶子用)和一根玻璃棒(開始攪拌或中間拿出來輕輕攪動,不能爆攪拌)以及一些相對干凈的紙(放玻璃棒)。
4.微波爐拿出的培養基冷卻不能太急,就丟水浴鍋里慢慢平衡,不要拿水激或放超聲里(實驗室曾有人這么做過,結果爆沸,沖出來老高,差點沒把眼睛燙瞎)。
5.為了加快速度和節約時間,第一次要記錄從加熱至開始沸的時間,為了防止不準,可以多記錄幾次,然后心里有數,直接設定那個時間,這樣可以適當快一些。
6.關鍵要點:膽大心細,時刻關注,不能離人(不要分心離開去做別的事情,沸和沸出去也就五秒的時間)。