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標準曲線的正確繪制很重要!

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-06-02
核心提示:標準曲線
 先來了解下最重要的三大檢驗項目:

1.精密度檢驗

標準曲線的精密度檢驗:精密度檢驗就是看試驗點距離擬合的直線的距離有無異常,所以也稱線性檢驗(擬合檢驗),需用F檢驗,P<0.05作為線性檢驗合格的標準。

2.截距檢驗

3.斜率檢驗

標準曲線的截距檢驗和斜率檢驗分別考察Y=a+bX中a和b與0的統計學差異,a與0有差別說明有試劑空白或系統誤差,而b若與0沒差別說明儀器的靈敏度根本達不到分析要求。

標準曲線的檢驗應該是線性檢驗結合失擬檢驗,以及殘差的正態性檢驗結合才是統計學上比較完備的。

 

標準曲線常見問題匯總

問題一:標準曲線需要人為的增加(0,0)點嗎?
答:不能。通常的標準系列多是配制0,1,2,3mg/L系列這樣的說法,沒做實驗人為添加(0,0)很不妥,因為很多時候0管進入儀器可能也有響應值,這也是我們考察試劑空白的一個重要步驟。這個0管在某些時候非常重要,如,全血鉛測定,我們采用牛血清來基體匹配標準系列,如果此時你用酸做空白或沒做實驗人為添加(0,0),那你就很難做好標準曲線,所以,標準曲線的0管也是做好標準曲線的重要考慮點。


問題二:標準曲線需要減掉試劑空白來做嗎?
答:不需要。儀器測出來標準系列的響應值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應值來做,工作中我們也常用0管來做儀器調零。其實沒有必要那么麻煩,即使空白或0管有響應值,在構建標準曲線時,我們已經認為該響應值就是0濃度,也就是扣除了這個空白的。

 

問題三:什么時候用Y=bx和二次曲線呢?
答:標準曲線我們通常采用的是Y=a+bX,曲線擬合完必須要做統計檢驗且要做統計完備的線性檢驗和失擬檢驗,然后再做a與0的差別檢驗,如果a與0的統計學上無差異,你就可以考慮用Y=bX的擬合曲線,擬合出來后同樣做線性檢驗和失擬檢驗,如果線性檢驗合格(P<0.05)且失擬檢驗合格(p>0.05)此時你就可以采用Y=bX。二次曲線的采用同樣是這樣的道理,如果你Y=a+bX時擬合不合格,你就考慮用Y=a+bX+cX2,同樣做失擬檢驗,考察擬合的符合情況。如果Y=a+bX 和Y=a+bX+cX2都滿足擬合檢驗和失擬檢驗合格,則采用Y=a+bX形式,這樣符合統計學上參數最少的統計簡潔性原則。


問題四:標準曲線去查含量時是先減空白信號算樣品含量還是先算出空白含量相減呢?
答:工作中我們常要減掉空白得到樣品含量,現有國家標準方法有的推薦先算出空白含量,用樣品含量相減,也有推薦先用樣品信號減空白信號然后去標準曲線推算含量。而且這兩種算法常常差距很大。其實這種差距往往是低含量水平時才出現,在低含量水平通過標準曲線推算含量時,本身不確定度就很大。這兩種方法都可以。個人推薦先用樣品信號減空白信號然后去標準曲線推算含量,因為這樣出來的含量不確定度要小一些,而先算出空白含量再相減就增加了1次標準曲線推算含量時的不確定度,因為好的測量永遠是不確定度小的測量。

 

 

結語

要想繪制出合格的標準曲線、使用好標準曲線,真心不易,必須將以上各個方面的條件都考慮進去,即對標準曲線的繪制也實行質量控制,只有這樣, 才能得出理想的標準曲線。

編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 標準曲線
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