PCR中文翻譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。自1985年P(guān)CR技術(shù)發(fā)明以來，技術(shù)發(fā)展已非常成熟了，PCR儀主要可以劃分為三類，即：常規(guī)PCR儀、實時熒光定量PCR儀、數(shù)字PCR儀。
  我們今天主要講實時熒光PCR儀。

PCR技術(shù)在近30年的不斷發(fā)展創(chuàng)新中,最受矚目的當(dāng)屬熒光實時定量PCR技術(shù)(real-time quantitative PCR,或qPCR)。

定量PCR技術(shù)真正實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,通過對PCR過程的實時監(jiān)控,專一、靈敏快速、可重復(fù)地精確定量起始模板濃度,已經(jīng)在科研和臨床診斷領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

PCR的工作原理是變性、退火、延伸三個步驟。

而對于實時熒光PCR儀的工作原理展開來講就是：將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光；隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度，求得Ct值（也就是，循環(huán)閾值，即：每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)），同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。

這么講可能你還不能完全理解，那你可以這么去理解，一個實時熒光定量PCR儀，最關(guān)鍵的是兩大系統(tǒng)，一個光電系統(tǒng)，一個溫控系統(tǒng)。光電系統(tǒng)是用來進(jìn)行光電信號收集和轉(zhuǎn)換的，溫控系統(tǒng)是用來維持核酸擴增所需對應(yīng)溫度條件的。最后電腦自帶軟件系統(tǒng)會通過相關(guān)關(guān)系方程式換算出臨床定量結(jié)果。

關(guān)于實時熒光PCR儀的廠家主要如下：

進(jìn)口廠家有羅氏診斷、美國伯樂、美國ABI（ABI已經(jīng)被賽默飛收購）。

國產(chǎn)老牌廠家主要是：上海宏石、杭州博日、西安天隆。