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DNA探針標(biāo)記常用試劑的配制

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-02-04  來源:網(wǎng)絡(luò)
核心提示:(1)10 ×缺口平移緩沖液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巰基乙醇、1mg/ml BSA。(2)缺口平移反應(yīng)
1)10 ×缺口平移緩沖液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巰基乙醇、1mg/ml BSA。
(2)缺口平移反應(yīng)終止液:200mmol/L NaCl;10mmol/l Tris-HCl,pH7.4; 11mmol/L EDTA; 0.5% SDS。
(3)DNase:干粉狀DNase(2000~3000u/mg)溶于20mmol/l Tris-HCl,pH7.5中(1mg/ml),10μl分裝,-20℃保存一年。
(4)10×DNA聚合酶(Klenow片段)緩沖液:500mmol/l Tris-HCl,pH6.6;100mmol/L MgCl2;10mmol/L DTT;0.5mg BSA。
(5)10×激酶緩沖液:500mmol/L Tris-HCl,pH7.4,50mmol/L MgCl2;20mmol/L DTT;1.0mmol/L亞精胺。
(6)10×隨機引物標(biāo)記緩沖液:500mmol/l Tris-HCl,pH6.6;100mmol/L MgCl2;10mmol/L β-巰基乙醇;500μg/ml BSA。
(7)1×加尾緩沖液:100mmol/L二甲胂化鉀,pH7.0,1mmol/l CoCl2 0.2mmol/L DTT。
(8)1mol/L MgCl
2:MgCl2 47.60g溶于500ml水中,100ml分裝,高壓滅菌,室溫保存。
(9)0.25mol/L EDTA(Ph8.0):EDTA 52.02g溶于400ml水中,調(diào)pH至8.0,加水至500ml,100ml分裝,高壓滅菌,室溫保存。
(10)4mol/L醋酸鈉:取無水醋酸鈉82g溶于200ml水中,用醋酸調(diào)pH至6.5,加水至250ml,高壓滅菌,或0.45μm膜過濾,室溫保存。
(11)10% SDS:10g SDS(十二烷基硫酸鈉)溶于50ml水中,加水至100ml,分裝后室溫保存。
(12)20×SSC:取NaCl 175.3g;檸檬酸鈉88.2g;加水至1000ml,用10mol/l NaOH調(diào)pH至7.0;高壓滅菌,室溫保存。
(13)無菌水:100ml去離子水或雙蒸水,分裝,高壓滅菌,室溫保存,開瓶后僅限一周使用。
(14)10×激酶緩沖液:500mmol/L Tris-HCl,pH7.4;100mmol/L MgCl2;50mmol/l DTT;10mmol/L亞精胺(非必需)。
(15)T4多聚核苷酸激酶:10u/μl,保存在甘油中,-20℃。
(16)TE緩沖液(Tris/EDTA):Tris,10mmol/l pH7.4(0.5ml 2mol/L貯存液),1.0mmol/l ED-TA,pH8.0(20μl 0.5mol/L)貯存液,加水至100ml,室溫保存。
(17)2mol/L Tris-HCl pH7.4:Tris242.2g溶于850ml,加濃HCl 75ml,邊加邊緩慢攪動,至pH7.4,于加水至1000ml。
(18)1mol/L DTT(二硫蘇糖醇):3.0g DTT溶于20ml水中,分裝,于-20℃貯存。
(19)0.5mol/L EDTA(乙二胺四乙酸二鈉鹽):在燒杯中先加入300ml水,加入93.5g EDTA-Na2·2H2O,充分混勻,加10mol/l NaOH調(diào)pH至8.0,加水至500ml。
(20)10mol/L NaOH:200g NaOH溶于450ml水中,混勻,再加水至500ml。
(21)5mol/L NaCl:292.25g NaCl,加水至1000ml。
(22)1mol/L HCl:加86.2ml濃鹽酸至913.8ml水中。
(23)1mol/L CaCl2:147g CaCl2:2H2O,溶于1000ml水中,高壓滅菌,室溫保存。
編輯:songjiajie2010

 
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