在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

食品伙伴網服務號
當前位置: 首頁 » 儀器設備 » 分子生物學儀器 » 正文

實時熒光定量PCR技術的兩種方法原理簡述

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-07-05  來源:上海撫生實業有限公司
核心提示:根據所使用的技術不同,實時熒光定量PCR可以分為:熒光探針和熒光染料兩種方法。現將其原理簡述如下:1. TaqMan熒光探針TaqMan探


根據所使用的技術不同,實時熒光定量PCR可以分為:熒光探針和熒光染料兩種方法。
現將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針
TaqMan探針法是高度特異的定量PCR技術,其核心是利用Taq酶的3'→5'外切核酸酶活性,切斷探針,產生熒光信號。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的3'→5'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成wan全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的shou選技術平臺
2. SYBR熒光染料
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加wan全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。SYBR熒光染料法定量PCR的基本過程是:
① 開始反應,當SYBR染料與DNA雙鏈結合時發出熒光;
② DNA變性時,SYBR染料釋放出來,熒光急劇減少;
③ 在聚合延伸過程中,引物退火并形成PCR引物;
④ 聚合完成后,SYBR染料與雙鏈產物結合,定量PCR系統檢測到熒光的凈增量加大。
實時熒光定量PCR技術根據化學原理可以分為探針類和非探針類。探針類實時熒光定量PCR技術主要是利用與靶序列特異雜交的探針來指示擴增產物的增加;非探針類實時熒光定量PCR技術主要通過熒光染料來指示產物的增加。無論是探針類實時熒光定量PCR技術還是非探針類實時熒光定量PCR技術,檢測的都是擴增產物的增加量。但探針類實時熒光定量PCR技術增加了識別探針的具體的流程,操作的難度較大。

編輯:songjiajie2010

 
分享:
[ 網刊訂閱 ]  [ 儀器設備搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦儀器設備
點擊排行
 
 
Processed in 0.129 second(s), 18 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 一级片影院 | 久久久久88色偷偷免费 | 麻豆色哟哟网站 | 91精品啪在线观看国产日本 | 日本在线一区 | 欧美一区a| 免费看国产一级片 | 日韩一区二区三区在线 | 丁香花高清在线观看 | 一区二区高清在线观看 | 精品国产三级在线观看 | 国产精品午夜国产小视频 | 伊人久久大香线蕉综合电影 | 国产在线观看色 | 亚洲 丝袜 制服 欧美 另类 | 精品xxxxxbbbb欧美中文 | 色综合久久久久久久久久久 | 成人看片免费无限观看视频 | 国产精品三级国语在线看 | 激情五月婷婷综合 | 狠狠干狠狠干 | 久久综合九色婷婷97 | 2020年亚洲天天爽天天噜 | 午夜视频精品 | 四虎在线网址 | 久久精品女人天堂 | 午夜寂寞视频在线观看 | 成人久久久 | 苍井优一级毛片免费观看 | 四虎永久在线日韩精品观看 | 成人免费看黄网站无遮挡 | 欧美1| 操您啦| 色天使在线播放 | 日本免费观看网站 | 国产h在线 | 欧美三级视频网站 | 999国产精品 | 国产在线视频网站 | 嫩草影院地址一地址二 | 美女黄页免费 |