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PCR反應(yīng)問題解答(二)PCR產(chǎn)物量過少

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-07-25  來(lái)源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
核心提示: 2. PCR產(chǎn)物量過少(1) 退火溫度不合適。以2℃為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。(2) DNA模板量太少。增加DNA模板量。
 2. PCR產(chǎn)物量過少

(1) 退火溫度不合適。以2℃為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。

(2) DNA模板量太少。增加DNA模板量。

(3) PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。

(4) 引物量不足。增加體系中引物含量。

(5) 延伸時(shí)間太短。以1kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時(shí)間。

(6) 變性時(shí)間過長(zhǎng)。變性時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。

(7) DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈

編輯:songjiajie2010

 
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