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ELISA試劑盒實驗包被問題解答(二)

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-09-06  來源:上海撫生實業有限公司
核心提示:二、包被用抗原天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。合成多肽抗原是抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有

二、包被用抗原

天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。合成多肽抗原是抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一個抗原決定簇,純度高,特異性也高,但由于分子量太小,往往難于直接吸附于固相上。借助于偶聯物與固相載體的吸附,間接地結合到固相載體表面。

三、包被用抗體

IgG對聚苯 烯有強吸附力,其聯結發生在Fc段上,ELISA試劑盒抗體結合點暴露于外。取材于抗血清或含單克隆抗體的培養液.須除去雜抗體后才能用于ELISA,以保證試驗的特異性。

腹水中單抗的濃度較高,特異性亦較強,因此不需要作吸收層析處理,直接包被。在某些情況下,用多種單抗混合包被,可取得更好的效果。

四、包被的條件

pH9.6碳酸鹽緩沖液

pH7.2的磷酸鹽緩沖液

pH7-8的Tris-HCL緩沖液

加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置,37℃中保溫2小時。ELISA試劑盒包被濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為10ng/ml-20μg/ml。

編輯:songjiajie2010

 
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