蛋白濃度測定的方法有很多，但每種方法都有其特點和局限性，因而需要在了解各種方法的基礎上根據(jù)不同情況選用恰當?shù)姆椒�，以滿足不同的要求。例如凱氏定氮法結果精確，但操作復雜，用于大批量樣品的測試則不太合適；Lowry法精確度較高，但是比較費時，且每步的時間要求相對嚴格；Bradford法靈敏簡便，但易受去垢劑的影響；BCA法以其試劑穩(wěn)定，抗干擾能力強，結果穩(wěn)定，靈敏度高而受歡迎。

2. BCA法：

原理：在堿性環(huán)境下，蛋白質將銅離子還原成亞銅離子，二喹啉甲酸（BCA）與亞銅離子形成紫色的絡合物，這種絡合物溶于水并在562nm處產(chǎn)生光吸收峰值，光吸收強度在一定范圍內(nèi)與蛋白質含量呈近似線性關系，因此使用比色法可以對蛋白質進行檢測和定量。BCA法沒有反應終點，反應會隨著時間而持續(xù)進行；通過一段時間的孵育后，反應速度會變慢，從而可以對大量樣品進行檢測。

優(yōu)點：

1. 靈敏度高，可以檢測到低至0.5μg/mL的蛋白質。

2. 對蛋白質分子量沒有要求，小分子量肽也可檢測。

3. 結果穩(wěn)定可靠，重復性好。

4. 可用于高通量的蛋白質測定。

5. 與Bradford法相比，可耐受一定濃度的去垢劑。

缺點：

1. 受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響：EDTA小于10mM，DTT和巰基乙醇均低于1mM。

2. 對不同蛋白質的反應性不同，因此不同蛋白質靈敏度有差異。

3. 與Bradford法相比，操作相對較復雜，需要多個步驟。