測定方法
試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)進行測定。具體步驟如下:
標準品稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔,加入不同濃度的標準品。
加樣:設空白孔和待測樣品孔,加入樣品稀釋液和待測樣品。
溫育:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時間(如30分鐘)。
洗滌:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。
加酶:每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。
再次溫育和洗滌:重復溫育和洗滌步驟。
顯色:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時間(如15分鐘)。
終止:加入終止液終止反應。
測定:在酶標儀上,通常選擇450nm波長測定各孔的吸光度(OD值)。根據標準品的濃度和對應的OD值繪制標準曲線,然后根據待測樣品的OD值在標準曲線上查找對應的濃度。
試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)進行測定。具體步驟如下:
標準品稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔,加入不同濃度的標準品。
加樣:設空白孔和待測樣品孔,加入樣品稀釋液和待測樣品。
溫育:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時間(如30分鐘)。
洗滌:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。
加酶:每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。
再次溫育和洗滌:重復溫育和洗滌步驟。
顯色:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時間(如15分鐘)。
終止:加入終止液終止反應。
測定:在酶標儀上,通常選擇450nm波長測定各孔的吸光度(OD值)。根據標準品的濃度和對應的OD值繪制標準曲線,然后根據待測樣品的OD值在標準曲線上查找對應的濃度。