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血液DNA提取試劑盒-血液DNAout

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-05-22
產品索引 5859
中文名稱: 血液DNA提取試劑盒
英文名稱: 血液DNAout
產品編號: 3671

產品類別:

分子生物學
生產廠家: 國產
產品價格: 90元
產品規格: 10 次(簡裝)
產品介紹:
本產品用于提取新鮮或冷凍的動物(包括禽類)及人抗凝全血基因組DNA。
 
性能指標:
1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。DNA產量為30-50 ml/mL全血。
2.操作簡單,整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規模樣品處理。血液處理量可達1 mL,不需要柱子,不會發生其他同類產品經常發生的堵塞現象。
3.價廉物美,與國外同類產品相比質量相當,但價格只有其一半左右。
4.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
 
使用方法:
將20-200 mg克剪碎的組織或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暫勻漿,65℃保溫5分鐘后15000 g離心1分鐘,上清尤氳忍寤?芤?SPAN lang=EN-US>B混勻, 冰浴2分鐘,15000 g離心1分鐘,上清加入等體積的氯仿(自備)混勻后15000 g離心5分鐘,最后用等體積異丙醇沉淀上清得到DNA沉淀,用1 ml 75%乙醇(自備)清洗2次后將沉淀溶于緩沖液中待用。
 
實驗數據:
圖一:血液DNAOUT效果圖

圖注:用本產品提取1 ml兔全血(左圖)和0.1 ml抗凝雞全血(抗凝劑:血液=1:1)得到的DNA(中圖),得到的DNA分別溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上樣,在0.8%瓊脂糖凝膠和1 X SuperBuffer中300 V電泳10分鐘后直接在UV燈下照相。M為全長l 嗜菌體DNA。按國內某試劑盒提取方法提取0.2 ml雞血,柱子在離心后被堵, 實驗失敗(右圖)。

 表一: 血液DNAOUT與國內某試劑盒提取血液DNA數據比較 

 
260/280
產率
兔全血
1.61(3)
16.58(3)
雞全血
1.82(3)
626.8(3)
鴨全血
1.83(3)
948.71(3)

 
關聯產品:
微量DNA助沉劑DNAdown
非凍型DNA組織保存液:DNALOCKER
超快DNA電泳緩沖液:SuperBuffer
 
血液DNAOUT 提取試劑盒使用說明
 
:   血液DNAOUT 提取試劑盒簡介
適用對象     新鮮或冷凍的動物及人抗凝全血基因組DNA的提取。
作用原理     所含去污劑裂解細胞并釋放出DNA,所含DNase抑制劑能抑制DNase的活性,所含去蛋白劑能清除血液細胞中所含的蛋白質成份。所含RNase能去除RNA的污染。
試劑盒成份       “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。
性能指標          DNA產量與國內同類產品相當。
使用優點    操作簡單     整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規模樣品處理。
DNA純凈    獲得的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
價廉物美      與國外同類產品相比質量相當,但價格便宜一半左右。
安全無毒    本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
物理特性     2-8℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑     氯仿,異丙醇,75%乙醇。
 
血液DNAOUT的使用
1.  在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”(冷凍血需先37℃水浴融化),吹打混勻。
2.       室溫離心15000rpm,2分鐘,沉淀呈紅色。小心傾去上清。
3.       再加入1ml“溶液A”,輕柔的吹打混勻,使細胞完全分散。
4.       室溫離心15000rpm, 2分鐘,沉淀呈粉白色。傾去上清。
5.       加入0.6ml“溶液B”(用前搖勻),用1ml吸頭徹底吹打混勻。
6.       68℃水浴10分鐘(此步可省略,但產量略有降低)。
7.       加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”,立即小心的顛倒混勻。
8.       室溫離心15000rpm,3分鐘,小心將上清(約0.7ml)轉移至一新的離心管中,加入等體積異丙醇,輕柔的顛倒混勻5-8次,此時出現絮狀DNA沉淀。
9.       室溫離心15000rpm,1分鐘,去盡上清。
10.  加入75%乙醇洗滌沉淀,室溫離心15000rpm,1分鐘。
11.  重復步驟10。
12.  室溫干燥DNA沉淀10分鐘,加入TE緩沖液0.1-0.3ml。65℃水浴10分鐘溶解DNA,中速振蕩5秒混勻。
 
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