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干貨解析:對于ELISA終止液您了解多少?

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-01-24  來源:本生(天津)健康科技有限公司
核心提示: 細胞氧化應激的定量評價方法大致分做三類:1)測定由活性氧修飾的化合物;2)測定活性氧消除系統酶和抗氧化物質的量;3)測定含

 

細胞氧化應激的定量評價方法大致分做三類:

1)測定由活性氧修飾的化合物;

2)測定活性氧消除系統酶和抗氧化物質的量;

3)測定含有轉錄因子的氧化應激指示物。

進一步尚有:

1)生物體內氧化應激的程度足以產生應答;

2)活體內難以蓄積;

3)在活體內不是被代謝,而是穩定存在,等等。理解這些要點對于臨床普及推廣都很有用。

細胞增殖-毒性檢測實驗操作步驟

終止液是用于測定細胞增殖或毒性實驗中活細胞數目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。下面以BUNSEN的CCK8試劑盒為例,簡要說明細胞增殖-毒性檢測的操作步驟

方法/步驟

1.在96孔板中配制100μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養 24 小時 (在 37℃,5% CO2 的條件下)。

2.向培養板加入10μl不同濃度的待測物質。

3.將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6,12,24或48小時)。

4.向每孔加入10μl CCK8溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。

5. 將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

如果暫時不測定OD值,打算以后測定的話,可以向每孔中加10μl 0.1M HCl溶液或者1%wSDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24小時內吸光度不會發生變化 。


編輯:songjiajie2010

 
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