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ELISA實驗不同樣本處理方法——細胞樣本

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-02-28  來源:上海撫生實業(yè)有限公司
核心提示:   可用于ELISA實驗樣本有血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、細胞裂解液、尿液、唾液、腦脊液等。不同的樣本類型有
   可用于ELISA實驗樣本有血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、細胞裂解液、尿液、唾液、腦脊液等。不同的樣本類型有不同的處理方法。

3. 細胞培養(yǎng)上清:

含有細胞分泌蛋白和死細胞的細胞培養(yǎng)液。

將細胞培養(yǎng)上清液吸入離心管中并以 1000×g 離心 20 分鐘,除去細胞碎片和雜質,收集上清液備用,樣本保存在-20℃或-80℃,避免反復凍融。

4. 細胞裂解液:

經細胞裂解液裂解后的細胞溶液。

(1)吸出培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用胰蛋白酶消化細胞,然后加入適量的培養(yǎng)基將培養(yǎng)板上的細胞沖洗干凈。 懸浮細胞可以省略該步驟。

(2)將細胞懸浮液收集到離心管中,以 1000×g 離心 10 分鐘,然后吸去培養(yǎng)基,用預冷PBS 洗滌細胞 3 次。

(3)加入適量的預冷 PBS(建議在使用前立即加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。在 6 孔培養(yǎng)板中,每個孔 需要 150-250μL 的 PBS 來重懸細胞。

(4)使樣本在-20℃或-80℃條件和室溫條件下反復凍融,重復凍融過程數(shù)次,直至細胞全裂解。也可 以使用超聲波細胞破碎器超聲處理懸浮液來裂解細胞。

(5)4℃下以 10,000×g 離心 10 分鐘,去除細胞碎片,收集上清液, -20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

編輯:songjiajie2010

 
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