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影響CHO細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模放大的關(guān)鍵角色

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-03-14  來源:上海樂純生物技術(shù)股份有限公司
核心提示:CHO細(xì)胞,以其獨特的優(yōu)勢,在生物制藥領(lǐng)域中扮演著舉足輕重的角色。因其能夠快速、高水平地表達(dá)多種重組蛋白,使用懸浮培養(yǎng)工藝易

CHO細(xì)胞,以其獨特的優(yōu)勢,在生物制藥領(lǐng)域中扮演著舉足輕重的角色。因其能夠快速、高水平地表達(dá)多種重組蛋白,使用懸浮培養(yǎng)工藝易于放大培養(yǎng),CHO細(xì)胞在生物制藥領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)治療型蛋白。但由于規(guī)模放大過程中各參數(shù)間的調(diào)整過于復(fù)雜,細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的放大仍然是一門通常依靠反復(fù)試驗來確定最佳工藝參數(shù)和操作策略的藝術(shù)。

關(guān)鍵工藝條件

   1.通氣

    在哺乳動物細(xì)胞生物反應(yīng)器中,通氣是一個關(guān)鍵組成部分,特別是在高細(xì)胞密度下操作時,因為需要向細(xì)胞提供足夠的氧氣,同時必須去除二氧化碳,以防止其在培養(yǎng)液中積累

  2.氧氣

  在CHO細(xì)胞培養(yǎng)中,溶氧水平通常保持在空氣飽和度的10%到80%之間。過高的氧濃度會導(dǎo)致活性氧(ROS)的積累,這會導(dǎo)致線粒體呼吸鏈和細(xì)胞內(nèi)氧化還原的改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞生長抑制和特異性生產(chǎn)力下降。另一方面,低氧條件也會誘導(dǎo)ROS積累。

  氧氣傳質(zhì)系數(shù)(kLa)用于衡量系統(tǒng)的氧氣傳輸能力。kLa主要與單位體積功率輸入(P/V)和表觀氣體速度(vs)相關(guān),其中K是常數(shù),指數(shù)α和β分別約為 0.4和0.5,氣泡大小、混合速度、氣體流速、體積和生物反應(yīng)器幾何形狀等工藝參數(shù)都會影響kLa。

  3.二氧化碳

  在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中,溶解的二氧化碳 (pCO2) 水平通常保持在4%-10%的CO2飽和度(30-70 mmHg)。高濃度的溶解CO2(150–200 mmHg)會對多種哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞生長和生產(chǎn)力產(chǎn)生不利影響。在CHO細(xì)胞培養(yǎng)中,高pCO2水平可抑制細(xì)胞生長、細(xì)胞生產(chǎn)力并改變產(chǎn)品質(zhì)量。

編輯:songjiajie2010

 
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