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微載體培養技術的介紹

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-04-26  來源:網絡
核心提示: 微載體培養技術(micro-carrier culture technique)于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術日趨完

 

微載體培養技術(micro-carrier culture technique)于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前公認最具發展前途的一種動物細胞大規模培養技術,其兼具懸浮培養和貼壁培養的優點,且容易放大。該技術已廣泛用于培養各類型細胞,如293細胞、成肌細胞、Vero細胞、CHO細胞。

一、 微載體

微載體是指直徑60-250 μm,能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。常用商品化微載體有三種:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。

二、微載體培養原理與操作

其原理是將對細胞無害的微載體顆粒加入培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。

貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴增三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,因此細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。細胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附,這取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。

由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因此微載體培養在操作中對攪拌轉速及攪拌方式的要求都十分嚴格。微載體培養要求攪拌的速度非常慢,最大速度75 r/min。細胞微載體培養通常分為三個時期:貼壁期,過渡期和培養期。貼壁期和過渡期可以使用超低速細胞磁力攪拌系統進行培養,該系統具有超低的攪拌速度,剪切力小且能在低速下充分混勻細胞。

三、微載體培養的優勢

產業化細胞培養首先需要提供足夠大的細胞生長面積,使培養容器單位容積所提供的細胞生長面積有所增加,從而提高疫苗和生化制劑的產量;其次需要加強和改善細胞培養的環境,有利于細胞生長;第三,細胞的均一化程度要高,在一個大發酵罐內培養細胞,生長環境需一致。要滿足以上三點要求,常規的培養瓶靜態培養,甚至是轉瓶都很難滿足,而微載體培養技術則能很好的解決這些問題。

總結

綜上所述,微載體的優勢可以歸納為以下幾點:表面積/體積大,單位體積培養液的細胞產率高;把懸浮細胞和貼壁細胞培養融合在一起,兼有兩者的優點;可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況;簡化細胞生長過程中對各種環境因素的檢測和控制,重現性好;培養基利用率較高;放大容易;細胞收獲過程不復雜;勞動強度小;培養系統占地面積和空間小等。

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編輯:songjiajie2010

 
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