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細胞支原體污染的檢測方法(一)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-09-12  來源:上海炎熙生物科技有限公司
核心提示: 培養(yǎng)的細胞可能會污染支原體,支原體是一種常見的細菌,它可以在實驗室環(huán)境中生長和繁殖。如果實驗操作不當,可能會導(dǎo)致支

 

培養(yǎng)的細胞可能會污染支原體,支原體是一種常見的細菌,它可以在實驗室環(huán)境中生長和繁殖。如果實驗操作不當,可能會導(dǎo)致支原體污染細胞培養(yǎng)物。此外,一些細胞系可能已經(jīng)被感染了支原體,一些培養(yǎng)用的試劑也可能帶有支原體。由于支原體體積很小,可以穿過0.22um的無菌過濾膜,且通過常規(guī)顯微鏡觀察很難發(fā)現(xiàn),因此常在不知不覺中傳播。為了避免支原體污染,實驗室應(yīng)該采取嚴格的操作規(guī)范和消毒措施,并且對所用的細胞和各種試劑進行檢測,以確保細胞培養(yǎng)物的純度和質(zhì)量。以下是一些檢測細胞污染支原體的方法:

一、體外培養(yǎng)法:培養(yǎng)法檢測支原體污染是經(jīng)典的檢測方法,通過將待檢測樣品先接種到支原體液體培養(yǎng)基中大量繁殖,然后再轉(zhuǎn)接種到支原體固體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后(幾天至近一個月),如果固體培養(yǎng)中出現(xiàn)典型的支原體菌落,則說明待測樣品有支原體污染。其優(yōu)缺點如下:

A.優(yōu)點:

a. 可以直接檢測細胞內(nèi)的支原體,具有較高的特異性和靈敏度。

b. 可以對不同類型的支原體進行鑒定和分類。

c. 可以對支原體進行藥物敏感性測試。

B.缺點:

a. 體外培養(yǎng)需要一定的時間,通常需要3-7天才能得到結(jié)果,少數(shù)生長慢的種類可能需要長達28天時間,因此該方法不能滿足緊急情況下的快速檢測需求。

b. 體外培養(yǎng)需要較高的技術(shù)水平和操作技巧,對實驗人員的要求較高。

c. 培養(yǎng)法對支原體的檢測效率受到多種因素的影響,如細胞的狀態(tài)、培養(yǎng)條件等,容易出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。

d. 培養(yǎng)法不能檢測支原體的DNA或RNA,不能用于分子生物學(xué)研究。

編輯:songjiajie2010

 
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關(guān)鍵詞: 污染
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