二、胎牛血清的凍存
1. 預(yù)冷處理:在將血清移入凍存容器之前,應(yīng)先將容器置于4℃冰箱中預(yù)冷至少30分鐘,以減少溫度驟變對血清的影響。
2. 逐步降溫:直接將血清置于-20℃或更低溫度下進行快速冷凍是不推薦的,因為這可能導(dǎo)致血清中的冰晶形成,從而破壞血清中的生物活性物質(zhì)。理想的做法是使用程序降溫儀,或者手動創(chuàng)建一個逐步降溫的環(huán)境,如先在4℃放置數(shù)小時,然后轉(zhuǎn)移至-20℃過夜,最后再放入-80℃超低溫冰箱長期保存。對于沒有條件使用程序降溫儀的實驗室,也可以采用“二步法”或“三步法”進行降溫,即先在4℃預(yù)冷,然后放入-20℃短暫過渡,最后轉(zhuǎn)移至-80℃或更低溫度。
3. 避免反復(fù)凍融:每次從冰箱中取出血清進行解凍后,應(yīng)盡量避免再次凍存。反復(fù)凍融會顯著降低血清的質(zhì)量,因為每次凍融都會造成血清中蛋白質(zhì)和其他生物活性分子的聚集和變性。